Лабораторний тест Phadebas® Honey Diastase Test — для кількісного визначення активності α-амілази (діастази) у різних видах меду

Phadebas® Honey Diastase Test — лабораторний тест для кількісного визначення активності α-амілази (діастази) у різних видах меду. Метод дозволяє оцінити діастатичну активність зразка фотометричним способом та отримати кількісний результат.

Принцип аналізу базується на використанні нерозчинного у воді полімеру крохмалю, що містить синій барвник. Під дією α-амілази субстрат гідролізується з утворенням водорозчинних фрагментів синього кольору. Інтенсивність забарвлення визначають фотометрично при довжині хвилі 620 нм. Значення абсорбції прямо пропорційне діастатичній активності досліджуваного меду.

Метод Phadebas® базується на методиці, спочатку опублікованій Зігенталером та згодом модифікованій Богдановим.

Порядок проведення аналізу

1. Для дослідження 1,00 г меду розчиняють в ацетатному буферному розчині у мірній колбі на 100 мл та доводять об’єм до мітки. 5,0 мл отриманого розчину переносять у пробірку та витримують у термостатованій водяній бані при температурі 40 °C не менше 5 хвилин.
2. Окремо готують контрольну пробу з 5,0 мл ацетатного буфера. До досліджуваного та контрольного розчинів додають по одній таблетці Phadebas®, перемішують до її розпадання та повертають пробірки у водяну баню.
3. Реакцію зупиняють рівно через 30 хвилин додаванням 1 мл 0,5 М розчину гідроксиду натрію. Після перемішування розчини центрифугують при мінімум 1500 об/хв протягом 5 хвилин або фільтрують. Абсорбцію вимірюють у кюветі 1 см при 620 нм.

Розрахунок результату

Від показника досліджуваного зразка віднімають абсорбцію контрольної проби та отримують значення ΔA620. Діастатичне число розраховується відповідно до формул, наведених виробником.

Результат виражається в одиницях Готе (DN) на грам меду.

Комплектація

Тест доступний у двох варіантах:

• Phadebas® Honey Diastase Test (50) — 1 флакон, 50 таблеток;
• Phadebas® Honey Diastase Test (500) — 5 флаконів по 100 таблеток.


Одна таблетка містить 45 мг синього крохмалю.

Необхідне обладнання

Для проведення аналізу необхідні фотометр із можливістю вимірювання при 620 ± 5 нм, термостатована водяна баня, vortex-змішувач, таймер, центрифуга не менше 1500 об/хв або обладнання для фільтрації, мірна колба, пробірки, пінцет та дозатори на 1 і 5 мл.

Зберігання

Зберігати у сухому місці при контрольованій кімнатній температурі. Після відкриття флакон необхідно щільно закривати та зберігати з осушувачем усередині.

Виробник: Phadebas AB, Швеція.